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目的研究长链非编码RNA(lncRNA)FOXD2-AS1在骨肉瘤组织及细胞株中的表达及对细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的作用与机制。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测36例骨肉瘤组织与癌旁组织中FOXD2-AS1的表达量并分析其表达与临床特征的关系。检测FOXD2-AS1在骨肉瘤细胞株(MG63，Saos-2，U2-OS，B)和人成骨细胞株(hFOB1.19)的表达，并选取两种高表达的细胞株敲降其表达，通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(AnnexinV-FITC)/碘化丙锭(PI)流式细胞术、Transwell实验检测增殖、凋亡、侵袭和迁移，并通过RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA-IP)、蛋白质印迹法(Westernblot)和ChIP检测FOXD2-AS1对EZH2和p21的影响。结果FOXD2-AS1在骨肉瘤组织中的表达高于癌旁组织(t＝17.，Plt;0.01)；并且在体积大、TNM分期高的骨肉瘤组织中表达量更显著(χ2＝4.、9.，Plt;0.01)。FOXD2-AS1在骨肉瘤细胞株中的表达量均高于人成骨细胞株(t＝14.、9.、5.，Plt;0.01)，尤其是在MG63和Saos-2细胞株中，敲降FOXD2-AS1的表达能够抑制增殖(Plt;0.05)、促进凋亡(Plt;0.01)和抑制侵袭和迁移(Plt;0.01)。RNA-IP、Westernblot和ChIP结果显示FOXD2-AS1与EZH2互作，敲降FOXD2-AS1降低了EZH2和H3K27me3与p21启动子区的分子结合。结论FOXD2-AS1能够提示临床预后不良，促进骨肉瘤细胞的恶性生物学行为，其机制可能是通过与EZH2互作，从而抑制p21的表达实现的。
目的观察免疫检查点分子B7-H3过表达对骨肉瘤细胞系MG63、U2OS、K7M2增殖和转移的影响。方法通过慢病毒介导的基因过表达技术，构建骨肉瘤细胞系MG63、U2OS、K7M2的对照组(空载体组)和实验组(B7-H3过表达组)细胞。在体外环境下，应用氮兰四唑盐/吩嗪硫酸甲酯(MTS/PMS)实验和克隆形成实验检测细胞增殖能力；应用划痕实验，检测细胞迁移能力。使用免疫健全的BALB/c小鼠，构建皮下成瘤模型和肺转移模型，检测体内环境下骨肉瘤细胞增殖和转移能力。应用GraphPad8统计软件分析，组间比较采用t检验分析。结果MTS/PMS实验结果显示，培养6d后，MG63、U2OS、K7M2实验组细胞吸光度(A)值(2.±0.、2.±0.、2.±0.)均比对照组(1.±0.、1.±0.、2.±0.)显著增高，差异有统计学意义(t＝4.、3.、3.，Plt;0.05)；克隆形成实验结果显示，在培养10d后，MG63、K7M2实验组细胞形成的克隆数[(24.±4.)、(32.±6.)个]明显高于对照组[(6.±2.)、(15.±3.)个]，差异有统计学意义(t＝6.、4.，Plt;0.05)，而U2OS实验组与对照组细胞形成的克隆数[(20.±3.)个比(19.±3.)个]，差异无统计学意义(t＝0.，Pgt;0.05)。划痕实验结果显示，3种骨肉瘤细胞实验组与对照组比较，在划痕愈合率方面的差异均无统计学意义。小鼠皮下成瘤模型表明，过表达B7-H3在体内环境下可以显著促进骨肉瘤的增殖。小鼠肺转移模型表明，过表达B7-H3在体内环境下可以显著促进骨肉瘤的转移。结论过表达B7-H3在体外环境可部分增强骨肉瘤细胞的增殖，而在体内环境下可显著促进骨肉瘤的形成和转移。
目的用生物信息学分析筛选骨肉瘤预后相关基因。方法从GeneExpressionOmnibus(GEO)下载GSE32、GSE21数据集。分析获得差异表达基因(DEGs)。对差异基因进行GO分析，构建蛋白互作网络。Cytoscape进一步筛选关键基因，对关键基因进行生存相关性分析。用临床样本验证关键基因与患者预后情况。两组间差异采用Student’st检验。结果筛选下调基因43个，上调基因43个，GO分析发现差异基因主要富集在免疫应答、抗原处理和呈递、免疫反应、蛋白质加工和成熟等免疫相关过程。在分子功能中，主要参与细胞内主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ类受体活性、核糖体结构组成、信号和分子转导活性等。在细胞组成成分方面，主要与主要组织相容性复合体蛋白质复合物、裂解空泡、液泡、溶酶体、细胞膜、核糖体等细胞器的功能有关。筛选出10个关键基因：补体C1qA链(CIQA)、补体C1qB链(C1QB)、补体C1qC链(C1QC)、单核细胞分化抗原CD14(CD14)、单核细胞分化抗原CD74(CD74)、IgE受体Fc片段(FCER1G)、纤维蛋白原样蛋白2(FGL2)、组织相容性抗原(HLA-DRA)、整合素β2亚基(ITGB2)、酪氨酸激酶结合蛋白(TYROBP)。生存分析发现C1QC与骨肉瘤患者生存呈明显负相关。临床样本证实C1QC与肿瘤Enneking分期、转移显著相关(χ2＝4.和9.，Plt;0.05)，与患者生存时间呈明显负相关(χ2＝5.，Plt;0.05)。结论生物信息学分析是有效的筛查方法，C1QC是骨肉瘤预后相关因子。
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